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    人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒試劑盒

    發(fā)布時(shí)間: 2016/4/25  點(diǎn)擊次數(shù): 691次
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    人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒試劑盒試驗(yàn)原理:
    PTHrP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PTHrP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PTHrP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTHrP的濃度呈比例關(guān)系。
    人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制
    自備材料
    1.蒸餾水。
    2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
    3.振蕩器及磁力攪拌器等。
    人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒安全性
    1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
    2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
    操作注意事項(xiàng)
    1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
    2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
    3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
    4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
    5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
    6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
    7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
    8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
    9.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
    樣品收集、處理及保存方法
    1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
    2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
    3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
    人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒試劑盒試劑盒性能
    1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
    2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
    3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
    結(jié)果判斷與分析
    1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PTHrP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PTHrP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
    3、檢測(cè)值范圍:0-400nmol/L
    4、敏感度: 1.0 nmol/L
     

     

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